| ジンクフィンガー蛋白質を用いる遺伝子の高感度・高速検出方法 |
| 本件は、亜鉛−結合部位を持った「ジンクフィンガー蛋白質」の特異的機能を利用して「標的核酸（遺伝子）」を高感度・高速に検出する新しい方法の提案であり、食中毒の原因菌の識別など幅広い分野に応用できる。ジンクフィンガー蛋白質とは、特定DNA配列に特異的に結合する「ジンクフィンガーモチーフ」を有する蛋白質で、数百種類以上が同定されている。典型的なモチーフはシステイン残基2個とヒスチジン残基2個を含み、4個の残基が亜鉛イオンに配位した立体構造をもち、特定配列の「二本鎖DNA」と特異結合する。すでに数千種類のジンクフィンガーモチーフが同定されている。目的とする特定DNA配列を認識するジンクフィンガー配列を設計することも可能と思われる。本発明は、PCR産物を「二本鎖のまま」特異的に検出する測定系を開発し、標的遺伝子を特異的に検出する方法を提供するものである。従来、標的遺伝子の特定領域の検出には、PCR法でこの遺伝子の特定領域を増幅し、「ハイブリダイゼーション法」でPCR増幅産物を検出する方法が用いられており、この過程で、二本鎖であるPCR産物を一本鎖とするプロセスがあり、このために検出精度の低下と反応に長時間を要することが避けられなかった。これに対し、本件技術は、PCR増幅産物を「二本鎖のまま」検出する方法を創成することにより精度と迅速性を大幅に向上させた。 |
| ユーザー業界 | 活 用 ア イ デ ア |
 食品・バイオ  生活・文化 | 食中毒予報システム ○日本全国の主要拠点で食中毒原因菌を常にモニターし、天気予報に準じた予報システムを構築 |
 化学・薬品 食品・バイオ 生活・文化 | 食品検査消費者センター ○食品の品種や産地表示の簡易検査システムを消費者センターで活用 臨床検査への応用 ○細菌の関与する病気診断システムへの応用。ヒト、動物、鳥などに適用する |
| 関連特許 | なし |
| 特許情報 |
・実施段階：実施無し ・技術導入時の技術指導の有無：応相談 ・ノウハウ提供：応相談 ・ライセンス制約条件について：許諾のみ |
| market potential | 本件技術の応用対象物は、菌体、農産物、食品、動物およびヒトからの組織、体液、血液、糞便などである。対象サンプルからDNAを調製し、PCR増幅を行い、増幅産物とジンクフィンガー蛋白質とを接触させ、その結合の程度を検出する。標識したジンクフィンガー蛋白質を用いて標識量を測定することで、PCR増幅産物に結合したジンクフィンガー蛋白質を定量することもできる。標識方法としては、放射性標識、蛍光標識、ビオチン、アビジン等のアフィニティー標識等が用いうる。本方法の好的用途の第一は、特定細菌を近縁細菌と区別して検出することである。例えば、食中毒の診断および予防のために食中毒原因菌と他の菌を区別して検出する必要がある。従来法は大変複雑で時間がかかったが、本方法は、高精度、迅速、特異的な検出法である。菌体だけでなく、農産物、食品、動物、ヒトへと適用対象を拡げることが期待される。 |
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