| 出願番号 |
特願2015-030734 |
| 出願日 |
2015/2/19 |
| 出願人 |
国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 |
| 公開番号 |
特開2015-171358 |
| 公開日 |
2015/10/1 |
| 登録番号 |
特許第6555683号 |
| 特許権者 |
国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 |
| 発明の名称 |
標的ＤＮＡに変異が導入された植物細胞、及びその製造方法 |
| 技術分野 |
食品・バイオ |
| 機能 |
検査・検出、材料・素材の製造 |
| 適用製品 |
標的ＤＮＡに変異が導入された植物細胞、該植物細胞を含む植物体、並びに該植物体の子孫、クローン及び繁殖材料 |
| 目的 |
標的ＤＮＡのみならず、該ＤＮＡ以外の領域にも、マーカー遺伝子等の不要な配列を残すことなく、必要な変異のみが標的ＤＮＡに導入された植物細胞の製造方法を提供すること。 |
| 効果 |
植物細胞において、相同組換えによりゲノムＤＮＡ内に挿入された不要な配列を、ｐｉｇｇｙＢａｃトランスポゾンごと痕跡残すことなく除去できる。しかも、その効率は９０％以上と顕著に高く、さらにｐｉｇｇｙＢａｃトランスポゼースにより切り出されたｐｉｇｇｙＢａｃトランスポゾンがゲノムＤＮＡに再挿入される率は１％と極めて低い。したがって、本発明によれば、植物細胞において、標的ＤＮＡのみならず、該ＤＮＡ以外の領域にも、マーカー遺伝子等の不要な配列を残すことなく、必要な変異のみを標的ＤＮＡに導入することが可能となる。 |
技術概要
 |
図１に示す系を実際に構築し、その有効性を検証した。その結果、植物細胞において、相同組換えによりゲノムＤＮＡ内に挿入された不要な配列（マーカー遺伝子）をｐｉｇｇｙＢａｃの利用により痕跡残すことなく除去できることが初めて明らかになった。しかも、その効率は９０％以上であり、哺乳動物におけるそれや植物細胞においてランダムにゲノムＤＮＡ内に挿入されたｐｉｇｇｙＢａｃを除去する効率（非特許文献１〜５ 参照）と比して、顕著に高いものであった。さらに、これら文献において開示されている従前の系においては、ｐｉｇｇｙＢａｃトランスポゼースにより切り出されたｐｉｇｇｙＢａｃがゲノムＤＮＡに再挿入される率は、哺乳動物の系においては約７０％、従前の植物の系においては約４０％と高いのに対して、驚くべきことに、図１に示す系におけるそれは１％と極めて低いものであることを見出し、本発明を完成するに至った。 |
| 実施実績 |
【無】 |
| 許諾実績 |
【無】 |
| 特許権譲渡 |
【否】
|
| 特許権実施許諾 |
【可】
|
)