| 出願番号 |
特願2010-271842 |
| 出願日 |
2010/12/6 |
| 出願人 |
国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 |
| 公開番号 |
特開2012-080871 |
| 公開日 |
2012/4/26 |
| 発明の名称 |
ＲＮＡの直接検出法 |
| 技術分野 |
情報・通信、有機材料、食品・バイオ |
| 機能 |
材料・素材の製造、食品・飲料の製造、安全・福祉対策 |
| 適用製品 |
試料中のＲＮＡを直接検出する方法、検出対象のＲＮＡをプライマーとして、鎖置換型ＤＮＡ合成酵素によってＤＮＡを増幅するローリングサークル増幅法（ＲＰＲＣＡ）を用いたＲＮＡの直接検出法およびその応用 |
| 目的 |
高度な設備を必要とせず、簡便な操作で、実用的な感度を有しながら迅速に行うことができる、ＲＮＡの検出方法であって、生物由来の夾雑物を含む試料中、特にＤＮＡが混入した試料においても、特異的な検出を可能とする方法を提供する。 |
| 効果 |
鎖置換型ＤＮＡ合成酵素を利用したＲＮＡプライムドローリングサークル型ＤＮＡ複製法（ＲＰＲＣＡ）を応用し、ＲＮＡの種類、３'末端配列情報等に影響を受けずに、簡便な操作で、逆転写反応を経由せずに、生物由来の夾雑物を含む試料中から直接ＲＮＡをｉｎ ｓｉｔｕやリアルタイムで検出可能な方法に関するものであり、研究、医療・臨床検査、食品産業など幅広い応用範囲において貢献できる。 |
技術概要
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生物由来の夾雑物を含む試料中のＲＮＡの検出方法であって、（１）検出対象のＲＮＡに相補的な配列を有する一本鎖ＤＮＡを環状化し、環状化一本鎖ＤＮＡプローブを作製する工程、（２）（１）において得られた環状化一本鎖ＤＮＡプローブと、試料中のＲＮＡとをハイブリダイズさせる工程、（３）（２）において得られたＲＮＡ−ＤＮＡハイブリッドから、ＲＮＡをプライマーとしてローリングサークル増幅法（ＲＣＡ）により一本鎖ＤＮＡを合成する工程、（４）（３）において合成された一本鎖ＤＮＡに結合する標識を添加し、当該標識を検知することによって検出対象のＲＮＡを検出する工程、さらに任意に（２）の後に（５）ＲＮａｓｅＨによりＲＮＡ／ＤＮＡハイブリッドのＲＮＡ鎖のみにニックを形成する工程を含む検出方法。 |
| 実施実績 |
【無】 |
| 許諾実績 |
【無】 |
| 特許権譲渡 |
【否】
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| 特許権実施許諾 |
【可】
| 実施権条件 |
平成１０年６月２９日付特総第１１７３号特許庁長官通達「特許権等契約ガイドライン」に基づき、案件ごとに協議のうえ決定。 |
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